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Label-free技术服务
技术概述
蛋白质非标记定量技术(label-free)是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做内部标准,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。与
iTRAQ
技术相比,Label-free的技术优势就在于蛋白质不需要昂贵的同位素标签进行标记,所需样品总量少,耗费低。
技术特征
1. 样本非标记,操作简单;
2. 易跟踪蛋白丰度;
3 .能够鉴别低丰度肽段;
4. 可以鉴定差异后再进行二级质谱蛋白鉴定;
5. 实验重现性低
项目实施
非标记定量
蛋白质组学
已成为越来越重要的质谱定量方法,按照其原理主要分为两种:
Spectrum counts类的非标记定量方法:发展比较早,已经形成多种定量算法,但主要原理都是以MS2的鉴定结果为定量基础,各种方法的差别在于后期算法在大规模数据上的修正。
另一种非标记定量方法的原理是以MS1为基础,计算每个肽段的信号强度在LC-MS色谱上的面积积分。
差异蛋白基因
(MF)
分子功能分析
Lalbel free技术数据(P
A
)通路分析
应用领域
疾病标志物筛选
作用机制研究
植物抗逆研究
药物作用靶点研究
特殊功能蛋白质筛选
样本要求
样品类型 样品要求
蛋白质提取物 浓度 >1μg/μl,蛋白质总量 >200μg
组织样品 动物、微生物组织湿重>10mg;植物鲜嫩组织>100mg
体液样品 血液体积>500μl
细胞样品 细胞量>10的7次方
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