CoIP实验步骤
免疫共沉淀技术流程图
Co-IP-MS质谱分析
客户案例(一)
蛋白-蛋白相互作用网络图
分子量检测 蛋白质谱检测 iTRAQ服务 靶向蛋白绝对定量
技术原理
免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation,Co-IP)技术已经成为经典的检测蛋白-蛋白间相互作用的测序技术,其基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;
随后加入能够与抗体FC段结合的protein-A/G(预先结合固化在琼脂小珠上),形成”结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物凝胶电泳分离蛋白,应用Western blot或者质谱分析鉴定靶蛋白的结合蛋白。
基云优势
免疫共沉淀与质谱结合,不仅能验证已知蛋白的相互作用,而且还可以鉴定与目标蛋白互作的未知蛋白,以及通过这种互作蛋白可能所影响到的某一信号通路,为生物研究提供一个新方向,为科研人员提供全新的实验思路。
基云生物CoIP实验实施的优势就在于在严格的质控标准下 ,为客户提供真实、可靠的数据,富集到的相互作用蛋白经过生物信息分析后,有利于科研人员从信号通路、互作网络等有据可依的基础上挑选感兴趣的互作蛋白作进一步的研究。
样品要求
提供包含目标基因的表达质粒(提供测序图谱)或基因的名称、序列;
提供细胞系和细胞培养的详细步骤;
提供相应抗体。
我们提供
提供免疫共沉淀X光片或者质谱鉴定数据;
提供具体试验步骤及相关分析数据等;
结题报告将以电子或书面形式递交到客户手中;
后续技术支持。
CoIP联合质谱客户群体